通络益肾方不同给药时期对DN大鼠足细胞损伤的影响

摘要：

目的:观察通络益肾方对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞超微结构及骨架蛋白表达的影响.方法:60只SD大鼠随机抽取10只为假手术组,余大鼠采用右肾切除+腹腔注射链脲佐菌素制备DN模型.成模后的大鼠随机分为DN模型组(模型组),缬沙坦治疗组(西药组),通络益肾方早期给药组(中药早期组)、6周给药组(中期给药组)、8周给药组(晚期给药组).每组10只.西药组予缬沙坦7.2 mg/kg灌胃,中药组予通络益肾方水煎液13.6 g/kg灌胃.中药早期组在造模成功后即予中药灌胃,中药中期和晚期组分别在造模成功后第6周、第8周开始中药灌胃.假手术组及模型组予蒸馏水灌胃.每日1次,共6周.检测大鼠24h尿蛋白定量(24 h PRO)、尿白蛋白、肾功能;透射电镜观察足细胞超微结构,免疫组化法检测α-actintin-4、synaptopodin、F-actin表达,RT-PCR检测Nephrin、CD2AP、α-actinin-4、synaptopodin、F-actin mRNA的表达.结果:(1)与假手术组比较,模型组24 h PRO、尿白蛋白、血尿素氮、血肌酐均明显升高(P＜0.01).与模型组比较,西药组、中药早期组、中药中期组上述指标均明显下降(P＜0.01);与中药早期组比较,中药中期和晚期组各检测指标均不同程度升高(P＜0.01,P＜0.05);(2)足细胞超微结构的变化:模型组足细胞结构不清、数目减少、密度降低,骨架纤维排列紊乱;西药组及中药各治疗组足细胞病变减轻,足细胞较为完整,足突排列相对整齐,细胞骨架纤维排列相对整齐,足突融合减轻;中药早期组优于中药中期组和中药晚期组;(3)免疫组化结果显示:与假手术组比较,模型组α-actintin-4、synaptopodin、F-actin表达显著下降(P＜0.01).与模型组比较,西药组、中药早期组、中期组上述指标均明显升高(P＜0.01,P＜0.05),中药晚期组差异无统计学意义(P＞0.05);(4)与假手术组比较,模型组Nephrin、CD2AP、α-actinin-4、synaptopodin、F-actin mRNA表达均明显下降(P＜0.01).与模型组比较,西药组及中药早期、中期组的各基因表达均显著升高(P＜0.01,P＜0.05),中药晚期组synaptopodin和F-actin表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论:通络益肾方可通过上调DN大鼠足细胞裂孔隔膜蛋白及骨架蛋白的表达而发挥其保护足细胞,抑制DN进展的作用,且给药时间越早,持续时间越长,效果愈显著.

关键词：通络益肾方、糖尿病肾病、足细胞、超微结构

所属期刊栏目：18

分类号：R2 ;R69

资助基金：国家自然科学基金资助项目81473671;陕西省中医药管理局科研基金资助项目13-LC064;陕西中医药大学附属医院科研项目2014-11

在线出版日期：2017-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：296-300,后插4-后插5