高糖培养下系膜细胞JAK2/STAT3信号转导通路活性变化及与活性氧簇作用的研究

摘要：

目的:通过观察高糖培养条件下大鼠肾小球系膜细胞P-STAT3的表达变化,探讨糖尿病状态下JAK2/STAT3途径活性的变化及该通路与活性氧簇(ROS)之间的相互作用.方法:用传代培养的大鼠肾小球系膜细胞同步化后分组:(1)正常糖浓度组(舍5.5 mmol/L),高糖浓度组(25 mmol/L),甘露醇组(5.5 mmol/L糖+19.5 mmol甘露醇),正常糖+AG-490(浓度10 μmol/L)组,高糖+AG-490(浓度10 μmol/L)组.继续观察培养后用Westem Blot及细胞免疫化学方法检测系膜细胞SFAT3、P-STAT3表达的变化.(2)正常糖浓度组(N),高糖浓度组(H),甘露醇组(M),正常糖+Apocynin组(N+A,Apocynin浓度为100 μmol/L),高糖+Apocynin组(H+A,Apocynin浓度为100 μmol/L),收集上清液,用比色法检测系膜细胞ROS水平.(3)NADPH氧化酶抑制剂Apocynin预处理,分组同(2),Apocynin提前1 h加入,与正常糖或高糖同时培养后,用Western Blot方法检测系膜细胞P-STAT3表达.结果:(1)高糖培养大鼠肾小球系膜细胞P-STAT3的表达较正常糖浓度组明显升高,甘露醇组与正常糖浓度组相比差异无统计学意义;各组之间STAT3表达差异无统计学意义.(2)高糖条件下,ROS产生明显升高,NADPH氧化酶抑制剂Apocynin可明显降低ROS的产生.(3)高糖条件下,Apocynin经预处理,在正常糖浓度和高糖浓度同时培养48 h后,正常糖浓度组和正常糖+Apocynin组对比P-STAT3的表达差异无明显区别;高糖+Apocynin组较正常糖浓度组有明显区别,但与高糖组相比明显降低.结论:高糖通过磷酸化方式激活大鼠肾小球系膜细胞JAK2/STAT3信号转导通路;高糖作用下,肾小球系膜细胞ROS产生增加,并具有时间依赖性;高糖状态下ROS可激活肾小球系膜细胞的JAK2/STAT3信号传导通路,证明ROS可能参与糖尿病肾病的发生和发展过程.

关键词：系膜细胞、高糖、信号转导和转录活化因子3、活性氧、糖尿病肾病

所属期刊栏目：10

分类号：R3 ;R73

在线出版日期：2009-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：386-391,插页1