泻火解毒法对竹叶青蛇伤致炎相关趋化因子及黏附分子的影响

摘要：

目的 观察泻火解毒法对竹叶青蛇毒导致血管内皮炎症损伤相关趋化因子及黏附分子的影响.方法 ①动物实验:取健康新西兰大白兔50只,按计算机产生的随机数字分为正常对照组、模型组,以及蛇伤胶囊低、中、高剂量组,每组10只.采用经兔右后腿皮下注射0.75 mL/kg竹叶青蛇毒液的方法复制竹叶青蛇伤动物模型;对照组给予等量生理盐水.制模后6h,蛇伤胶囊低、中、高剂量组分别给予蛇伤胶囊溶液174、348、522 mg· kg-1·d-1(用生理盐水稀释为17.4、34.8和52.2 g/L的药液,灌胃量均为10 mL· kg-1·d-1);模型组和正常对照组灌胃等量生理盐水;均每日灌胃1次,连续灌胃1周.于末次灌胃后24 h经耳缘静脉采血,离心取血清备用.同时取兔腹主动脉全段,保存于液氮中备用.②细胞实验:以改进的Eagle培养液(MEM)培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)24h,按计算机产生的随机数字分为空白对照组、模型组和蛇伤胶囊药物血清低、中、高剂量组,每组10孔.于细胞培养液中加入5 mg/L竹叶青蛇毒液复制竹叶青蛇毒中毒细胞模型.培养6h后,模型组和空白对照组给予10％正常兔血清,药物组给予5％、10％和15％含药血清.培养72 h后,收集细胞提取总RNA.用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测兔腹主动脉及HUVEC白细胞介素-8(IL-8)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)的mRNA表达水平;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测兔血清E-选择素(CD62E)含量.结果 模型组腹主动脉和细胞IL-8、MCP-1、ICAM-1和VCAM-1的mRNA表达水平及CD62E含量均较对照组显著升高[以正常对照组和空白对照组IL-8、MCP-1、ICAM-1和VCAM-1的mRNA表达水平均为1,动物模型组上述指标的mRNA表达水平(2-△△Ct)分别为3.96±0.39、3.07±0.27、3.71±0.26、3.94±0.26,细胞模型组上述指标的mRNA表达水平(2-△△Ct)分别为3.53±0.70、2.24±0.48、3.13±0.44、2.80±0.13,均P＜0.01],模型组血清CD62E含量亦较正常对照组显著升高(μg/L:1.31±0.22比0.82±0.13,P＜0.01),蛇伤胶囊低、中、高剂量组腹主动脉和细胞IL-8、MCP-1、ICAM-1和VCAM-1的mRNA表达水平均较模型组明显降低[腹主动脉:IL-8 mRNA(2-△△Ct)为1.13±0.19、1.26±0.16、1.27±0.17比3.96±0.39,MCP-1 mRNA(2-△△Ct)为1.79±0.24、2.22±0.38、1.76±0.19比3.07±0.27,ICAM-1 mRNA (2-△ △Ct)为2.05±0.11、1.68±0.09、2.37±0.48比3.71±0.26,VCAM-1 mRNA (2-△△Ct)为1.59±0.08、1.40±0.11、1.84±0.11比3.94±0.26;细胞:IL-8 mRNA(2-△△Ct)为2.33±0.59、2.82±0.82、2.51±0.77比3.53±0.70,MCP-1 mRNA (2-△ △Ct)为1.59±0.35、1.48±0.36、1.54±0.29比2.24±0.48,ICAM-1 mRNA (2-△ △Ct)为1.46±0.38、1.77±0.65、1.73±0.50比3.13±0.44,VCAM-1mRNA (2-△△Ct)为2.49±0.24、2.18±0.19、2.45±0.24比2.80±0.13,均P＜0.05],蛇伤胶囊中、高剂量组血清CD62E含量均较模型组明显降低(μg/L:1.01±0.14、1.04±0.13比1.31±0.22,均P＜0.01),但3个剂量组比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 泻火解毒法能通过抑制竹叶青蛇伤引起的炎症反应治疗竹叶青蛇伤血管内皮损伤.

关键词：泻火解毒法、蛇伤胶囊、竹叶青蛇、炎症反应、血管内皮损伤

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分类号：R3 ;R25

资助基金：国家自然科学基金81302978;福建省自然科学基金2012J01379;福建中医药大学校管课题重点学科专项X2014033-学科,X2014034-学科,X2014035-学科

在线出版日期：2017-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：192-195