银杏叶提取物对特发性肺间质纤维化成纤维细胞表型转化过程中NOTCH信号通路的影响

摘要：

目的 观察博莱霉素(BLM)致肺纤维化动物模型中NOTCH信号通路对成纤维细胞(FB)表型转化的影响,探索中药银杏叶提取物(GBE)治疗肺纤维化的作用机制.方法 20只昆明小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、γ分泌酶抑制剂DAPT组、GBE组,每组5只.采用气管切开注入BLM 5 mg/kg复制小鼠肺纤维化模型,对照组给予生理盐水1.25 ml/kg.GBE组于制模当日开始灌胃GBE 0.6 g·kg-1·d-1,DAPT组于制模后次日灌胃DAPT5 mg·kg-1·d-1,隔日1次.28 d处死小鼠,取左肺组织行苏木素-伊红(HE)染色,观察肺泡炎和肺纤维化程度;用免疫组化染色及蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测NOTCH1及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达.结果 模型组肺纤维化程度最重,肺泡间隔增宽,肺泡连续性受到破坏,肺泡直径和面积大小不均匀,终末小气道周边炎性细胞浸润明显,血管周边也发现明显的炎性细胞浸润现象,同时伴有纤维化形成,以支气管周边区域较为明显,外周局部区域也有局灶性的纤维化表现,GBE组及DAPT组肺纤维化程度较模型组明显减轻.免疫组化显示,模型组NOTCH1及α-SMA的蛋白含量较对照组明显增高[NOTCH1(A值,×103):129.21±1.28比59.60±8.25,0-SMA(4值,×103):108.23±21.73比55.42±9.23,均P＜0.05];GBE组和DAPT组NOTCH1、α-SMA蛋白含量均较模型组明显降低[NOTCH1(A值,×103):GBE组为70.54±2.46,DAPT组为67.38±2.35;α-SMA(A值,×103):GBE组为68.95±3.46,DAPT组为61.63±1.99,均P＜0.05];Western Blot结果显示,模型组NOTCH1、α-SMA的蛋白表达水平较对照组增高;GBE组和DAPT组NOTCH1、α-SMA的蛋白表达水平较模型组明显降低.结论 NOTCH信号通路激活参与了肺纤维化中FB向肌成纤维细胞(MFb)表型转化过程,中药GBE通过抑制NOTCH信号通路的激活达到减轻肺纤维化的作用.

关键词：成纤维细胞、表型转化、NOTCH信号通路、银杏叶提取物

所属期刊栏目：23

分类号：R28;R56

资助基金：湖北省武汉市卫计委专项基金资助项目WZ14D09

在线出版日期：2016-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：417-420