10.3969/j.issn.1008-9691.2016.04.018
复元醒脑汤对糖尿病脑梗死大鼠内皮祖细胞功能的作用研究
目的 观察复元醒脑汤对糖尿病脑梗死大鼠内皮祖细胞(EPCs)功能的干预作用.方法 将120健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、假手术组、模型组、治疗组,每组30只.采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)50 mg/kg后给予高能量高脂肪饲料喂养2周的方法复制糖尿病大鼠模型;制模后由颈内动脉注入自体血栓复制糖尿脑梗死模型;假手术组注射生理盐水.制模后治疗组给予复元醒脑汤[人参10 g(单煎)、三七10 g、石菖蒲12 g、水蛭10 g、益母草30 g、生南星15g、制大黄9 g(后下),浓度388 g/L] 10.4 mL· kg-1·d-1灌胃,每日2次,连续7d;假手术组、模型组给予等量生理盐水灌胃,连续7d.取大鼠外周血10 mL离心,吸取界面层的单核细胞,传代培养后用于实验.用流式细胞仪检测各组细胞CD31、CD34、血管内皮生长因子受体-1(FLK-1)和血管性血友病因子(vWF)的表达量,将具有双标阳性的细胞作为EPCs的阳性表达,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖能力,并测定细胞迁移能力.结果 假手术组EPCs表达量较对照组显著降低[FLK-1为(34.64±1.92)%比(41.68±1.53)%,vWF为(40.92±1.16)%比(51.98±1.06)%],EPCs增殖率培养1d起即较对照组显著降低[(0.014±0.001)%比(0.021±0.001)%],持续到培养30 d[(0.084±0.009)%比(0.121±0.003)%],EPCs迁移率亦较对照组显著降低[吸光度(A)值:32.80±4.15比62.20±3.27,均P<0.05];模型组EPCs表达量较假手术组显著降低[FLK-1为(30.19±2.00)%比(34.64±1.92)%,vWF为(38.54±2.19)%比(40.92±1.16)%],细胞增殖率培养1d起即较假手术组显著升高[(0.009±0.001)%比(0.014±0.001)%],持续到培养30 d[(0.057±0.005)%比(0.084±0.009)%],EPCs细胞迁移率均显著低于假手术组[(18.00±1.58)%比(32.80±4.15)%,均P<0.05];治疗组EPCs表达量较模型组升高[FLK-1:(35.90±1.57)%,vWF:(42.05±0.85)%],但差异无统计学意义(均P>0.05),培养1d治疗组细胞增殖率与模型组比较差异无统计学意义,随着培养时间延长,两组逐渐显现出统计学差异,培养2d起治疗组EPCs增殖率(A值:0.042±0.003)显著高于模型组(P< 0.05或P<0.01),持续到培养30 d(A值:0.098±0.004),细胞迁移率(A值:43.20±3.27)较模型组明显升高(P<0.01).结论 复元醒脑汤可提高糖尿病脑梗死大鼠EPCs的增殖、迁移能力,从而使其受损的血管内皮功能得到修复,进而促进局部血管再生和侧支循环的建立.
复元醒脑汤、内皮祖细胞、糖尿病脑梗死
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R28;R27
国家自然科学基金81273725
2016-09-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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