叶下红对实验性肝脂肪变大鼠的保护作用及其分子机制

摘要：

目的：探讨叶下红对实验性肝脂肪变大鼠的保护作用及其分子机制。方法将70只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、高或低剂量叶下红组及高剂量叶下红+磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2（pERK1/2）抑制剂（PD98059）组（PD组）。正常对照组予以普通饲料；其余各组予以高脂低蛋白饲料联合30%四氯化碳（CCl4）花生油2 mL/kg每3 d皮下注射1次，连续3周制备动物模型。制模后叶下红组以高、低剂量叶下红提取物（5.0 g/kg和2.5 g/kg）灌胃，每日1次；PD组每日1次灌胃5.0 g/kg叶下红提取物后加用0.3 mg/kg PD98059每周1次尾静脉注射。3周后均改为普通饲料，第5周末取肝组织进行病理学观察；用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）水平，采用免疫组化染色、蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）及流式细胞术检测固醇调节元件结合蛋白1（SREBP-1）、pERK1/2、Toll样受体4（TLR4）、高迁移率族蛋白B1（HMGB1）阳性细胞计数及蛋白表达；用羟胺法及硫代巴比妥酸（TBA）法检测肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。结果高、低剂量叶下红组及PD组肝组织小叶炎症较模型组减轻（分：1.50±0.53、1.80±0.43、1.20±0.42比2.30±0.48），ALT、AST、TC、TG、SREBP-1、MDA均较模型组减少，以高剂量叶下红组最为明显〔ALT（U/L）为51.91±6.95比66.50±12.15，AST （U/L）为125.70±5.62比147.10±10.52，TC（mmol/L）为1.79±1.04比2.81±1.08，TG（mmol/L）为0.87±0.55比1.17±0.67，SREBP-1为（30.60±5.56）%比（53.10±5.02）%，MDA（nmol/mg）为5.20±0.87比10.61±5.45， P＜0.05或P＜0.01〕；pERK1/2、TLR4、HMGB1相对表达量与模型组比较差异无统计学意义〔pERK1/2为（43.77±4.93）%比（46.83±5.27）%，TLR4（相对荧光强度）为69.12±24.64比69.08±24.32，HMGB1（相对荧光强度）为22.93±14.88比33.17±13.29，均P＞0.05〕；而PD组上述各指标值与高剂量叶下红组接近，说明细胞外调节蛋白激酶（MEK）抑制剂对叶下红作用无影响。结论叶下红能减轻实验性肝脂肪变肝损伤程度，明显减轻肝小叶炎症，其机制可能与减轻氧化应激反应有关，SREBP-1可能参与其作用的发挥。

关键词：叶下红、肝脂肪变性、固醇调节元件结合蛋白1、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2、Toll样受体4、高迁移率族蛋白B1、超氧化物歧化酶、丙二醛

分类号：R44;R36

资助基金：广东省中医药强省科研课题20131053

在线出版日期：2015-12-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：591-595