艾迪注射液对人肺腺癌A549细胞放疗敏感性的增加作用及其机制

摘要：

目的：观察艾迪注射液对人肺腺癌A549细胞放疗敏感性的影响，分析其可能存在的机制。方法①给予不同浓度的艾迪注射液（1.875、3.75、7.5、15、30、60 mg/mL）处理A549细胞24 h，同时设置空白对照组，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测艾迪注射液对人肺腺癌A549细胞增殖的影响，计算10%细胞生长抑制剂量浓度（IC10），以IC10作为实验药物浓度。②实验分为空白对照组、艾迪对照组、射线处理组和艾迪预处理组。艾迪对照组给予艾迪注射液IC10孵育24 h；射线处理组给予4 Gy X射线照射后孵育24 h；艾迪预处理组给予艾迪注射液IC10孵育24 h后给予4 Gy X射线照射；空白对照组给予等量生理盐水孵育24 h。采用细胞克隆形成实验检测细胞存活分数（SF）；采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测组蛋白H2AX的139号位点丝氨酸磷酸化为γ-H2AX、同源重组修复途径中的关键蛋白Rad51和细胞自噬体标志性蛋白微血管相关蛋白1轻链3（LC3）的蛋白表达情况；用透射电镜观察自噬体形成情况。结果艾迪注射液对人肺腺癌A549细胞增殖具有抑制作用，各剂量艾迪注射液组A549细胞增殖较空白对照组较低，随药物浓度增加，细胞生长抑制率（IR）逐渐增加，呈浓度依赖性，IC10为3.09 mg/mL。与空白对照组比较，艾迪对照组细胞SF无明显变化〔（94.7±3.85）%比（100.0±0.00）%，P＞0.05〕，射线处理组SF下降〔（71.8±5.90）%比（100.0±0.00）%，P＜0.05〕，而艾迪预处理组较放疗组进一步下降〔（51.9±4.73）%比（71.8±5.90）%，P＜0.05〕。3个治疗组γ-H2AX蛋白表达均较空白对照组明显增加，以艾迪预处理组最为显著，而且明显高于射线处理组（灰度值：1.44±0.11比0.93±0.09，P＜0.05）；但Rad51蛋白表达以射线处理组为最高，且高于艾迪预处理组（灰度值：1.37±0.07比0.78±0.04，P＜0.05）。艾迪对照组、射线处理组、艾迪预处理组的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值较空白对照组有所增加，以艾迪预处理组增加最显著（0.35±0.06、0.37±0.07、0.49±0.06比0.05±0.04，均P＜0.05）。与空白对照组比较，各治疗组自噬体形成均有不同程度的增加，以艾迪预处理组增加最为明显。结论艾迪注射液对A549细胞具有放疗增敏的作用，其机制可能与上调A549细胞自噬水平有关。

关键词：艾迪注射液、A549细胞、放疗增敏、自噬、DNA损伤修复

分类号：R73;R97

资助基金：国家自然科学基金资助项目81560379；江西省科技支撑计划项目2015BBG70236；江西省教育厅科技研究项目14025

在线出版日期：2015-12-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：582-586