凉膈散抑制创伤失血性休克大鼠肝脏实质细胞凋亡的机制研究

摘要：

目的 观察凉膈散对创伤失血性休克大鼠肝脏细胞凋亡的影响,并探讨其机制.方法 健康雄性Wistar大鼠90只,随机分为正常组,模型1、3、6、24 h组和凉膈散1、3、6、24 h组,每组10只.采用骨折后经颈动脉放血制备创伤失血性休克大鼠模型.凉膈散组于制模前连续3 d灌胃凉膈散10 ml/kg;模型组给予等量生理盐水;正常组不予任何处理.取血,采用速率法测定血浆天冬氨酸转氨酶(AST)浓度;取肝组织,用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,用免疫组化法检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白表达,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bax、Bcl-2、Fas、FasL的基因表达.结果 模型组1、3、6、24 h血AST(U/L)呈上升趋势,24 h达峰值(647.36±60.02),与正常组(66.69±19.95)比较差异有统计学意义(均P<0.05);凉膈散组各时间点血AST(194.24±29.53、 306.01±83.85、 388.36±92.71、 451.48±99.70)均较模型组显著降低(均P<0.05).正常组未见凋亡细胞;模型组1、6、24 h时有散在凋亡细胞,3 h时中央静脉周围肝脏实质细胞出现大量凋亡(个:20.60±0.47);凉膈散组3 h时只发现肝窦内淋巴细胞凋亡(个:14.70±1.02),较模型组显著降低(P<0.05).模型组1、3、6和24 h caspase-3 蛋白表达(×103,A值)均较正常组(8.96±1.22)显著升高,3 h达峰值(49.71±0.89);凉膈散组各时间点caspase-3表达(17.81±0.48、 34.48±1.09、 28.52±1.14、 31.76±1.39)较模型组显著下降(均P<0.05).模型组各时间点凋亡相关基因表达均较正常组升高,且Bax、Bcl-2、Fas均于3 h达峰值(1.98±0.07、0.87±0.07、0.25±0.02),FasL于6 h达峰值(0.57±0.02);凉膈散组在3 h(0.40±0.03)和6 h(0.18±0.03)能显著降低Bax基因表达(均P<0.05),对Bcl-2基因表达无明显影响(均P>0.05),且未检测到Fas和FasL基因表达.结论 凉膈散能够抑制创伤失血性休克大鼠肝脏caspase-3蛋白表达及Bax、Fas、FasL基因表达,但对肝脏Bcl-2表达无明显影响;能显著抑制肝脏实质细胞凋亡,促进肝窦内出现淋巴细胞凋亡,从而避免炎性细胞过度活化造成对组织的损伤.

关键词：凉膈散、休克、创伤失血性、肝脏、凋亡

所属期刊栏目：18

分类号：R285.5;R541.64(中药学)

资助基金：天津市医药卫生科研基金资助项目05KZE17

在线出版日期：2011-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：82-85,前插一