PI3K/Akt通路在EGFR/KRAS不同遗传背景NSCLC细胞对TRAIL敏感性中的作用

摘要：

[目的]探讨PI3K/Akt通路在肿瘤坏死冈子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导携带EGFR/KRAS不同基因表型的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞凋亡中的作用.[方法]CCK8法检测TRAIL对A549和PC9细胞活性的影响;Western blot检测TRAIL作用后Ak1 、p-Akt蛋白表达的变化.使用PI3K特异性抑制剂LY294002处理细胞,CCK8法检测对TRAIL抗细胞增殖活力的影响;流式细胞术检测对TRAIL诱导细胞凋亡和细胞周期影响.[结果]当TRAIL浓度＜100 ng/ml时,A549和PC9细胞的存活率与对照组无明显差异.当TRAIL浓度分别为100 ng/ml[(64.29±11.39)％vs (100±12.07)％,t=6.900,P=0.020]、[(74.57±9.70)％vs(100±11.20)％,t=4.786, P=0.041]和500ng/ml[(48.85±10.92)％vs(100±12.07)％,t=13.390,P=0.006] [(46.34±8.99)％vs(100±11.20)％,t=18.419,P=0.003]时,A549和PC9细胞存活率明显低于对照组.TRAIL以时间依赖的方式上调A549和PC9细胞内的p-Akt的水平.使用LY294002抑制PI3K/Akt通路活性能够明显增加TRAIL抑制A549细胞[(40.74±2.53)％vs(64.29±9.30)％,t=6.092,P=0.026]和PC9细胞[(42.38±3.40)％) vs(74.57±7.92)％,t=12.689,P=0.006]增殖的能力,诱导更多的A549细胞[(44.98±8.99)％vs(23.07±2.92)％,t=7.836,P=0.016)]和PC9细胞[(46.32±7.42)％vs(3.44±1.46)％,t=40.727,P=0.001)]凋亡,并使细胞周期更多地阻滞在G0/G1期[(73.60±3.43)％vs(60.20±5.48)％;(70.51±3.86)％ vs(42.37±4.55)％](P均＜0.05).[结论]TRAIL引起的PI3K/Akt通路活化,可拮抗TRAIL的诱导凋亡作用.抑制PI3K/Akt活性可明显增强EGFR-TKI敏感的和EGFR-TKI不敏感的NSCLC细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性.

关键词：PI3K/Akt、非小细胞肺癌、TRAIL、细胞凋亡

所属期刊栏目：25

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目资助12541270

在线出版日期：2016-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：70-75