mTERT启动子调控的CD80-SEA基因重组腺病毒载体的构建及在不同肿瘤细胞中的表达研究

摘要：

目的:构建小鼠端粒酶反转录酶(mTERT)启动子调控的葡萄球菌肠毒素A(SEA)和CD80基因共表达重组腺病毒载体,并观察其介导的SEA和CD80在小鼠肝癌细胞Hepal-6、结肠癌细胞CT26、黑色素瘤细胞B16和成纤维细胞NIH3T3中的表达情况.方法:采用AdEasy腺病毒体系,亚克隆mTERT核心启动子区至穿梭质粒pShuttle2,并在其上游插入myc-Max反应元件MMRE,用来调控SEA及CD80基因的表达,构建SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体Ad-MMRE-mTERT-BIS,转化Ad293细胞制备病毒并纯化,然后将病毒以感染复数为100的浓度分别感染上述四种细胞.采用免疫荧光染色法及流式细胞术检测SEA和CD80在细胞膜表面的表达情况.结果:以感染复数为100病毒量感染上述细胞后,CD80和SEA的不同肿瘤细胞上表达率不同,而病毒感染的NIH3T3细胞不表达SEA和CD80.结论:成功地构建了mTERT启动子调控的SEA和CD80基因共表达重组腺病毒载体,能够调控SEA和CD80基因在不同肿瘤细胞中的靶向表达,但表达效率有所不同.为进一步采用同一腺病毒对不同肿瘤细胞的进行靶向基因治疗研究奠定了基础.

关键词：葡萄球菌肠毒素A、CD80、端粒酶反转录酶启动子、腺病毒

所属期刊栏目：20

分类号：R73-36(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30772524

在线出版日期：2011-06-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：151-155