干扰PTEN基因表达影响人正常胃黏膜上皮细胞系GES-1增殖和凋亡

摘要：

目的:探讨PTEN对体外培养的人胃黏膜上皮细胞系GES-1增殖凋亡的影响及其磷酸化通路研究.方法:体外培养GES-1细胞,构建针对PTEN基因的shRNA慢病毒载体,感染GES-1细胞系,干扰PTEN的表达,实验分为空白对照组、慢病毒阴性对照组和干扰PTEN实验组;荧光显微镜、实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测其感染效率;CCK8测定GES-1细胞的增殖,流式细胞术测定细胞的周期和凋亡;实时荧光定量PCR检测GES-1的PTEN、Akt、ERK的mRNA表达水平;Western blot检测GES-1的Akt和磷酸化Akt(p-Akt),ERK 1/2及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表达.结果:干扰PTEN的慢病毒成功感染GES-1,降低了PTEN基因的转录和翻译水平.与空白对照组相比,PTEN表达降低后使G0/G1期的细胞比率减低,而G2/M和S期细胞比率增高,同时凋亡细胞减少,促进GES-1的增殖而抑制其凋亡.p-Akt和p-ERK1/2表达显著上调(P＜0.05),而对GES-1的Akt和ERK的mRNA及总蛋白表达没有影响(P＞0.05).结论:抑癌基因PTEN可以通过促进Akt和ERK的磷酸化,调节GES-1细胞下游的相关凋亡和信号通路,进而调节GES-1的增殖和凋亡.

关键词：PTEN、GES-1、Akt、ERK1/2、增殖、凋亡

所属期刊栏目：36

分类号：R969(药理学)

资助基金：重庆市教委科技计划项目编号:KJ111804

在线出版日期：2016-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1473-1477