高效液相色谱法测定人红细胞中6-甲基巯基嘌呤核糖核苷酸的浓度
目的:建立测定人红细胞6-甲基巯基嘌呤核糖核苷酸(6-MMPR)浓度的高效液相色谱法.方法:红细胞首先经70%高氯酸沉淀蛋白,并在酸性条件下100℃加热45min,6-MMPR水解生成6-甲基巯嘌呤(6-MMP)后进样分析.以6-MMP定量分析6-MMPR浓度.色谱柱为Hypersil GOLD C18柱(4.6mm×250mm,5μm),检测波长290 nm,柱温35℃;流动相为0.02 mol·L-1磷酸钾缓冲液(pH3.3)-乙腈(95:5);流速0.9 mL·min-1.结果:红细胞中6-MMP在80.91~3236.36 pmol·(8×10 8)-1红细胞浓度范围内线性关系良好(r2=0.9985),最低定量浓度为80.91 pmol·(8×10 8)-1红细胞.日内及日间RSD分别小于2.09%,5.61%,方法回收率为100.27%~110.79%,平均提取回收率大于70%.结论:该法操作简便快速、灵敏、专属性强,可应用于患者服用硫唑嘌呤后红细胞6-MMPR浓度的测定.
6-甲基巯基嘌呤核糖核苷酸、6-甲基巯嘌呤、高效液相色谱法
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R927.2(药典、药方集(处方集)、药物鉴定)
湖北省自然科学基金2009CDB380
2011-08-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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