超声波法与酶解法联合制备短刺小克银汉霉原生质体及其活性评价

摘要：

目的 采用超声波细胞仪破碎法与酶解法联合制备短刺小克银汉霉原生质体,提高原生质体的制备量.方法采用蜗牛酶将短刺小克银汉霉细胞壁消化,采用超声波细胞破碎仪机械破碎加速其原生质体的释放,得到符合实验要求的原生质体.结果 通过正交实验优化得到制备短刺小克银汉霉原生质体的条件是:以0.6 mol/mL 氯化钾作为渗透压稳定剂,以10 mg/mL 蜗牛酶为酶解剂,选用菌龄为12 h 的菌丝,在37℃下酶解2 h,最后使用超声波细胞破碎仪破碎菌丝体15 min.短刺小克银汉霉活性原生质体的释放量是7.5×107 个/mL,且其7 d 内的存活率维持在90% 以上.结论 超声波细胞仪破碎法和酶解法联合使用可有效提高短刺小克银汉霉原生质体的释放率和活性.

关键词：短刺小克银汉霉、原生质体、超声波细胞仪破碎法、酶解法

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分类号：TQ920.1(其他化学工业)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81173503;福建省自然科学基金资助项目2012J01398;国家自然科学基金培育计划专项资助

在线出版日期：2013-05-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：26-29