Cell SELEX技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子的初步研究

摘要：

目的 利用Cell SELEX 技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子.方法 通过80 mg/L 氧化性低密度脂蛋白诱导THP-1 巨噬细胞为泡沫细胞;聚合酶链反应扩增文库;生物素- 链霉亲和素磁珠分离法构建单链DNA 文库;以巨噬细胞源性泡沫细胞为靶细胞,巨噬细胞和血管平滑肌细胞为反筛细胞,利用Cell SELEX 技术筛选与巨噬细胞源性泡沫细胞结合的寡核苷酸序列,并对最后一轮筛选结果进行克隆测序.结果 PCR 的退火温度对PCR 产物的量有显著的影响,退火温度由65℃提高为72℃时的产物量明显增加.利用生物素- 链霉亲和素磁珠分离法获得了纯度高、产量大的ssDNA文库;经过18 轮筛选后,成功获得了28 个与预期大小相同的ssDNA 序列.结论 利用Cell SELEX 技术筛选出了巨噬细胞源性泡沫细胞的适配子,为研发用于动脉粥样硬化的早期无创诊断试剂和靶向治疗药物奠定了基础.

关键词：Cell SELEX技术、巨噬细胞源性泡沫细胞、适配子、随机ssDNA文库

所属期刊栏目：2

分类号：R392.3

在线出版日期：2013-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：25-28