白木香转录因子AsWRKY25的分子克隆与表达分析

摘要：

目的 克隆和表达白木香(Aquilaria sinensis)转录因子基因AsWRKY25并进行特性分析,为深入研究其生物学功能奠定基础.方法 以白木香愈伤组织总RNA反转录的cDNA为模版,采用聚合酶链式反应技术(PCR)克隆基因CDS全长;通过生物信息学工具和软件分析编码蛋白的生物学特性,通过组织特异性表达分析不同组织中的基因表达模式.构建pET-28a-AsWRKY25原核表达载体,在大肠杆菌BL21 (DE3)中进行原核诱导表达及鉴定.结果 从白木香愈伤组织中克隆到了AsWRKY25转录因子基因,其CDS全长1 728 bp,编码575个氨基酸;该序列密码子优化后连接到pET-28a表达载体中,在大肠杆菌BI21(DE3)中成功诱导表达,其适合诱导条件为1 mmol·L-1 IPTG,37℃连续培养6h.组织表达分析结果表明,AsWRKY25在白木香的沉香层中的表达量最高,在根、茎、枝中的表达量最低.结论 成功克隆并表达了白木香WRKY类转录因子AsWRKY25,该转录因子可能参与了沉香的伤害诱导形成过程.

关键词：白木香、AsWRKY25、基因克隆、原核表达、表达分析

所属期刊栏目：54

分类号：Q7(分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;协同创新项目;中组部万人计划;国家重点研发计划

在线出版日期：2020-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1919-1925