基于毛细管区带电泳的IgG2型单抗电荷异质性分析方法的建立

摘要：

目的 建立IgG2型单抗毛细管区带电泳(CZE)电荷异质性分析方法.方法 通过对三乙基四胺(TETA)和6-氨基己酸(EACA)浓度,以及电泳缓冲液pH和毛细管分离温度等参数进行优化,建立能够有效分离和定量IgG2单抗电荷异构体的CZE分析方法,并对该方法进行方法学验证和应用评价.结果 TETA和EACA浓度,以及电泳缓冲液pH和毛细管分离温度的变化,会影响IgG2单抗的电荷异构体分离效果,通过一系列参数的优化,最终确定了方法参数(400 mmol·L-1EACA/0.05％ TETA,pH 6.2,分离电压30 kV,分离温度35℃).建立的CZE分析方法可以有效地对IgG2单抗电荷异构体进行分离,并具有良好的精密度,峰面积的RSD值小于3.0％.该方法同样适用于IgG1和IgG4型单抗的电荷异质性分析,同时,根据电泳图谱和迁移时间,能够对不同亚型和靶点的单抗进行有效的区分鉴别.结论 建立的IgG2型单抗毛细管区带电泳方法,可有效分离电荷异构体,并具有良好的精密度,可作为平台方法应用于IgG2型单抗的电荷异质性分析和鉴别.

关键词：IgG2单抗、电荷异质性、毛细管区带电泳、方法优化、质量控制

所属期刊栏目：53

分类号：R917(药物基础科学)

资助基金：国家“重点研发计划”生物安全关键技术研发专项资助2016YFC1200904;国家“重大新药创制”军队特需生物防治药质量控制研究项目资助2016ZX09J16101

在线出版日期：2018-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：627-631