白杨素对顺铂及喜树碱诱导肝肿瘤细胞Hep G2凋亡的增敏作用

摘要：

目的 研究天然产物白杨素(chrysin)对损伤DNA的抗肿瘤药物顺铂和喜树碱诱导肝肿瘤细胞(Hep G2)死亡的作用及机制.方法 白杨素以不同浓度单独/联合顺铂或喜树碱处理Hep G2,于倒置显微镜下观察肿瘤细胞形态变化,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分析细胞活性,获得细胞死亡的定量资料;并以Western blot方法分析凋亡标志蛋白caspase-3和多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)以及凋亡抑制蛋白Bcl-xL、xIAP、FLIP相应的变化情况.结果 形态学观察可发现白杨素联合顺铂或喜树碱处理可明显增加Hep G2细胞的死亡,MTT法分析显示,白杨素联合抗肿瘤药物处理细胞,无论与未处理对照比较还是与单独白杨素、单独顺铂或单独喜树碱处理比较,均使细胞活性显著降低(P＜0.05);Hochest 33342荧光染色表明,联合白杨素和抗肿瘤药物处理细胞可观察到明显的核固缩,而未处理对照及单独白杨素、单独顺铂或喜树碱处理则无此作用;Thermo高内涵筛选系统分析结果显示,联合白杨素和抗肿瘤药物处理可使凋亡细胞显著增加(P＜0.05).Western blot检测到凋亡标志蛋白caspase-3和PARP活化降解;全caspase酶抑制剂z-VAD-fmk可有效阻止凋亡标志蛋白caspase-3和PARP的活化降解.白杨素联合顺铂可抑制顺铂上调的凋亡抑制蛋白FLIP和xlAP表达,而白杨素联合喜树碱可降低喜树碱引起的凋亡抑制蛋白Bcl-xL的高表达.结论 天然产物白杨素能有效促进DNA损伤类抗肿瘤药物诱导的Hep G2细胞凋亡,核因子(NF)-κB调节的凋亡抑制蛋白表达降低是其重要的机制.

关键词：白杨素、顺铂、喜树碱、凋亡、核因子-κB

所属期刊栏目：51

分类号：R286.91(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;广东省科技计划;广东省科技计划;广州市科技计划

在线出版日期：2017-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：2088-2093