线粒体损伤在槲皮素诱导人乳腺癌MCF-7细胞中的作用
目的 探讨槲皮素(quercetin)诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡过程中,线粒体损伤作用及其可能机制.方法 建立槲皮素(80.0 μmol·L-1)诱导MCF-7细胞凋亡模型.采用透射电镜观察槲皮素诱导MCF-7细胞凋亡过程中线粒体病变情况.荧光探针DCFH-DA、Fluo-8/AM检测槲皮素处理的MCF-7细胞内活性氧(ROS)、Ca2+离子水平.采用胞外Ca2螯合剂胞(1mmol·L-1EGTA)和胞内Ca2+阻断剂(1 nmol·L-ryanodine)进行阻断试验,流式细胞术检测阻断前、后细胞凋亡情况.采用Western blot检测细胞浆、线粒体细胞色素C(Cyt C)的表达.结果 槲皮素可诱导MCF-7细胞线粒体损伤,呈现球形肿胀、线粒体嵴消失、大量空泡形成.细胞内ROS、Ca2+水平升高.胞内钙离子阻断剂ryanodine可抑制槲皮素的细胞凋亡作用,细胞凋亡率分别下降55.4% (24 h),30.0% (48 h)和39.9% (72 h),胞外钙离子螯合剂EGTA则无抑制作用.处理24,48和72 h的MCF-7细胞,胞浆内Cyt C表达升高,线粒体CytC表达变化不大.结论 线粒体损伤在槲皮素诱导MCF-7细胞凋亡中起重要作用,其机制可能与胞内ROS的升高,胞浆内Ca2和Cyt C释放有关.
槲皮素、MCF-7细胞、细胞凋亡、线粒体、活性氧、细胞色素C
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R378.3;R965(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家级大学生创新创业训练计划资助项目201610354023;2012年度嘉兴市重点科技创新团队资助项目2012-03
2016-12-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1765-1770