梓葛冻干粉针对体外氧糖剥夺/再灌注损伤大鼠大脑皮层星形胶质细胞的保护作用
目的 探讨梓葛冻干粉针(C-P)对体外氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)损伤大鼠大脑皮层星形胶质细胞的保护作用及可能的机制.方法 原代分离培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞,神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光鉴定星形胶质细胞的纯度.实验分正常组、模型组、辅料组、C-P:12.25、24.50、49.00 μg· mL-1组.对星形胶质细胞进行OGD 6h/R 12h损伤并同时给予C-P.噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率、比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、TUNEL荧光染色法检测细胞凋亡率.利用试剂盒的方法分别检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性,谷胱甘肽(GSH)、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的含量以及一氧化氮(NO)的释放量,ELISA法测定细胞培养液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和前列腺素(PG)E2的含量,Western blot检测细胞内caspase-3,诱导型一氧化氮合酶(iNOS),环氧酶(COX)-2,核因子(NF)-κB p65,p-NF-κB p65,IκB-α,p-IκB-α蛋白表达量.结果 原代培养的星形胶质细胞纯度在97％以上.与正常组相比,模型组细胞存活率显著降低,LDH漏出率及细胞凋亡率明显增高;细胞内SOD活性和GSH含量明显降低,MDA和ROS含量显著升高;细胞培养液中NO、TNF-α、IL-1β和PGE2的释放量也显著增加.而以上相关生化指标均可被不同剂量的C-P所抑制.辅料组与模型组无显著差异.进一步研究发现,C-P能显著抑制OGD/R损伤引起的细胞中caspase-3、iNOS、COX-2蛋白表达量及NF-κB p65和IκB-α的磷酸化水平的增高.结论 C-P对体外OGD/R损伤的星形胶质细胞具有保护作用,其保护机制与其抗炎、抗氧化以及抑制细胞凋亡和NF-κB信号通路的激活有关.
梓葛冻干粉针、星形胶质细胞、氧糖剥夺/再灌注损伤、炎症反应、氧化应激、细胞凋亡
51
R965(药理学)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;中国博士后科学基金
2016-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1124-1130
