UPLC-MS用于体外大鼠肝微粒体CYP1A2和CYP2D1酶代谢活性表征及动力学研究

摘要：

目的 建立大鼠肝微粒体CYP1A2和CYP2D1酶活性的快速测定方法并考察两种CYP酶反应动力学.方法 利用CYP1A2和CYP2D1选择性探针底物即非那西丁与右美沙芬进行温孵实验,采用超高压液相色谱与质谱联用(UPLC-MS)的方法建立相应代谢产物的含量测定方法.结果 非那西丁代谢产物对乙酰氨基酚的线性范围为0.409 ～ 10.227μmol·L-1(r2 =0.999 1),LOD和LOQ值分别为0.067和0.267 μmol·L-1;右美沙芬代谢产物去甲右美沙芬为0.020～5.051 μmol·L-1(R2=0.998 0),LOD和LOQ值分别为0.002和0.007μmol·L-1.方法回收率分别为95.9％～104.0％和102.1％～107.1％,精密度以RSD值表示均低于5％.CYP酶活性测试及反应动力学表明,CYPl A2和CYP2D1的米氏常数(Km值)分别为(28.4±2.7)和(13.9±1.3) μmol·L-1;其代谢活性(底物浓度为10 μmol·L-1时)分别为(1.47±0.12)和(3.98±0.09)nmol·mg-1.结论 本实验建立的UPLC-MS分析方法快速、灵敏、准确、可靠,适用于药物代谢研究中CYP1A2和CYP2D1体外活性测定及其反应动力学分析.

关键词：UPLC-MS、CYP1A2、CYP2D1、选择性探针、大鼠肝微粒体、反应动力学

所属期刊栏目：50

分类号：R969.1(药理学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2015-07-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1043-1047