柚皮苷及其代谢物柚皮素对乳鼠颅骨成骨细胞分化成熟影响的比较研究

摘要：

目的 比较研究柚皮苷及其代谢物柚皮素对体外培养乳鼠颅骨成骨细胞分化成熟的影响.方法 无菌条件下剥离新生SD大鼠颅骨,采用Ⅱ型胶原酶多次消化,分离得到原代乳鼠颅骨成骨细胞,待原代细胞铺满80％皿底时行传代培养.噻唑蓝法检测细胞的增殖情况,碱性磷酸酶活性的高低作为检测药物影响乳鼠颅骨成骨细胞分化成熟的指标,筛选得到最佳的药物浓度.在乳鼠颅骨成骨细胞的培养体系中添加最佳浓度的柚皮苷和柚皮素,酶联免疫分析法检测柚皮苷组、柚皮素组和对照组之间骨钙素、骨形态发生蛋白-2、骨桥蛋白和Ⅰ型胶原的分泌量,比较钙化结节数量的差异,并用实时定量荧光逆转录聚合酶链反应法检测成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子-1、Runx-2、Osterix、OPG及RANKL的基因表达情况.结果 柚皮苷和柚皮素均能明显提高乳鼠颅骨成骨细胞的碱性磷酸酶活性,刺激骨钙素、骨形态发生蛋白-2、骨桥蛋白和Ⅰ型胶原的分泌,增加钙化结节数量,并促进成骨相关基因的mRNA表达,但柚皮素的活性明显高于柚皮苷.结论 柚皮素促进乳鼠颅骨成骨细胞分分化成熟的活性显著高于柚皮苷,说明柚皮苷经代谢后,其代谢产物柚皮素的促骨形成活性得到增强,在抗骨质疏松新药的开发及剂型设计方面均具有一定的指导意义.

关键词：柚皮苷、柚皮素、成骨细胞、分化、成熟

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分类号：R915;R965(药物基础科学)

资助基金：国家科技重大专项重大新药创制2011ZX09401-308-28;国家自然科学基金资助项目81073037;国家自然科学基金资助项目31071043;陕西省中医管理局中医药科研课题2011ZY44

在线出版日期：2013-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1373-1379