菌根真菌诱导的铁皮石斛根差减cDNA文库构建

摘要：

目的 构建菌根真菌共生诱导的铁皮石斛根的差减cDNA文库,从中筛选出差异表达基因.方法 采用SMARTer PCRcDNA合成方法直接以总RNA为模板合成并富集稀少cDNA,再利用抑制消减杂交(SSH)方法构建受菌根真菌共生诱导铁皮石斛根的差减cDNA文库.结果 成功构建了受菌根真菌诱导铁皮石斛根的差减cDNA文库,共获得1 975个阳性克隆.经检测,90％以上克隆能扩增出有效产物,其插入片段大小在150～1 000 bp之间.随机挑取了20个克隆菌液测序并进行了比对分析,大部分为植物应对环境胁迫防御性基因.结论 该技术体系所构建的差减cDNA文库质量较好,操作方便,尤其适用于珍稀濒危的植物材料.

关键词：铁皮石斛、菌根真菌、抑制消减杂交、cDNA文库、共生

所属期刊栏目：47

分类号：R284(中药学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31170314;中国博士后科学基金资助项目20080440328

在线出版日期：2013-02-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1790-1796