荚膜红细菌十聚异戊二烯焦磷酸合成酶异源表达及纯化的研究

摘要：

目的 构建生产辅酶Q10的大肠杆菌基因工程菌并研究相关酶的表达情况.方法 将荚膜红细菌(Rhodobacter capsulatus B10)中十聚异戊二烯焦磷酸合成酶编码基因ddsA分别克隆在Lac,T7和Trc启动子下游,使其在Escherichia coli JM83中表达.同时利用His-tag的表达系统,对该酶的融合表达和镍柱纯化条件进行了研究.结果 产物分析发现该基因在E.coli中表达出有活性的十聚异戊二烯焦磷酸合成酶,并使宿主产生辅酶Q10.同时,28℃培养过夜,该酶以可溶形式存在于上清液中.在150 mmol·L-1咪唑的洗涤条件下,从镍柱上解离,并可以达到电泳纯.结论 大肠杆菌可以表达Rhodobacter capsulatus B10的十聚异戊二烯焦磷酸合成酶,并合成辅酶Q10.

关键词：辅酶Q10、十聚异戊二烯焦磷酸合成酶、融合表达、镍柱纯化

所属期刊栏目：42

分类号：R9(药学)

在线出版日期：2007-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：13-16