大肠杆菌T蛋白的高效表达和分离纯化

摘要：

目的构建高效表达菌株,以大量表达大肠杆菌T蛋白,为后续的新药作用靶点研究提供活性蛋白质材料.方法利用高效表达质粒pET26b+克隆了大肠杆菌TyrA基因,并在其C端融合了一个由6个组氨酸组成的his-tag以利分离纯化.结果 T蛋白的表达量达每1 L培养液200 mg,细胞裂解液经一次his-tag亲和柱色谱,纯度达98%,分支酸变位酶和预苯酸脱氢酶的比活性分别为130和98 U*mg-1.结论本法表达的大肠杆菌T蛋白,表达量高,纯化容易,酶活性正常,为进一步研究T蛋白的结构与功能,并进行新药设计奠定了基础.

关键词：T蛋白、分支酸变位酶、预苯酸脱氢酶、表达

所属期刊栏目：38

分类号：Q812(生物工程学(生物技术))

资助基金：浙江省自然科学基金 302110

在线出版日期：2004-02-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：707-710