超声微泡介导EGFP质粒对视网膜母细胞瘤细胞转染效率的实验研究

摘要：

目的探讨不同浓度的超声微泡造影剂,在不同声强的超声辐照下,介导DNA质粒转染视网膜母细胞瘤(RB)细胞的效率及可行性,为实现外源基因高效、定向的转移奠定基础.方法将培养的RB细胞分别予以超声条件为0.25, 0.5, 0.75, 1.0, 1.25 W/cm2, 60 s的连续波辐照,微泡造影剂浓度为1%, 10%, 20%,30%,以筛选出对RB细胞活性无明显抑制的最适超声声强、辐照时间和微泡浓度.根据以上筛选条件,转染EGFP基因入RB细胞,24～48 h后,在荧光显微镜下观察EGFP表达情况,并用RT-PCR对EGFP mRNA进行半定量检测.结果声强＜0.75 W/cm2 (60 s),以及微泡浓度＜20%时,对RB细胞的活性无明显抑制.当微泡浓度10%,超声声强为0.5 W/cm2或0.75 W/cm2时,介导的DNA质粒对RB细胞转染具有较高的转染效率,明显高于其他实验组.超声声强为0.5 W/cm2或0.75 W/cm2介导的转染效率,在统计学上差异无显著性意义.结论浓度适当的微泡在优化的声强条件下,能够有效地提高DNA质粒在RB细胞中的转染效率.

关键词：超声检查、造影剂、微泡、视网膜母细胞瘤、基因治疗

所属期刊栏目：22

分类号：R445.1;Q95-33(诊断学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划30430230;国家高技术研究发展计划863计划30370402

在线出版日期：2006-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：163-166