共价结合生长因子胶原补片对人骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响

摘要：

目的：制备与碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）共价结合的胶原蛋白海绵补片，探讨其对人骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响。方法制备胶原补片，随机分为空白对照组和实验组。空白对照组胶原补片在无菌条件下经碳化二亚胺处理，实验组胶原补片于室温条件下利用N-羟基硫代琥珀酰亚胺＋磷酸盐缓冲液＋1-（3-二甲基丙基）-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶液处理，并与bFGF和VEGF共价结合。保存后1、3、7、14、21、28天采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测上清液中bFGF和VEGF含量。将人骨髓间充质干细胞均匀接种于两组胶原补片上，分别进行细胞计数、MTT检测以及溴脱氧尿苷单克隆抗体增殖实验，并采用SMA免疫荧光染色检测细胞分化情况，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达情况。结果实验组胶原补片与VEGF和bFGF结合率均显著高于空白对照组（P＜0.05）。绘制释放曲线并分析发现，实验组生长因子处于稳定状态，仅有极少数发生解离释放。制备后28天，大部分生长因子存留于胶原补片上。随时间推移，两组胶原补片上骨髓间充质干细胞均呈增长趋势。接种后3天、7天比较显示，实验组胶原补片上碳化二亚胺数量均显著多于对照组（P＜0.05）。经RT-PCR检测和SMA免疫荧光染色发现，与空白对照组相比，实验组胶原补片上细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平均显著下调（P＜0.05）。结论 bFGF和VEGF共价结合的胶原补片可以对人骨髓间充质干细胞产生较大影响，有效促进其增殖并抑制分化。

关键词：胶原蛋白海绵、生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子、人骨髓间充质干细胞、增殖、分化

所属期刊栏目：8

分类号：TB3;O62

在线出版日期：2016-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：108-112