硼替佐米对血管紧张素Ⅱ诱导的ApoE-/-小鼠腹主动脉瘤形成的影响

摘要：

目的 研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米(BTZ)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠腹主动脉瘤(AAA)形成的炎性机制的影响.方法 8～10周龄雄性ApoE-/-小鼠40只,喂养1周适应后随机分为Sham组、BTZ组、AngⅡ组和AngⅡ+BTZ组4组,每组10只.AngⅡ组采用皮下埋植AngⅡ缓释泵[1000 ng/(min·kg)]复制动物AAA模型,BTZ组和AngⅡ+BTZ组同时给予蛋白酶体抑制剂BTZ腹腔注射50μg/kg每周2次.28 d后取材测量统计腹主动脉最大直径及AAA发生率.采用HE染色观察组织中炎症反应情况,免疫组织化学染色及流式细胞分析技术检测组织中T淋巴细胞数目,qPCR检测组织中黏附因子(ICAM-1)的mRNA表达,Western blot检测组织中核转录活化因子信号通路(NF-κB)表达变化.结果 Sham组、BTZ组、AngⅡ组和AngⅡ+BTZ组小鼠的腹主动脉最大直径平均值分别为(1.00 ±0.01)、(0.99±0.01)、(1.50±0.13)和(1.20±0.04) mm (F=8.959,P=0.000),其中,AngⅡ组明显高于Sham组(P=0.000)和AngⅡ+BTZ组(P=0.015).AngⅡ组、AngⅡ+BTZ组和Sham组的AAA发生率分别为60％、17％和0.HE染色结果显示,AngⅡ组血管壁厚度及炎症细胞浸润数目较Sham组和AngⅡ+BTZ组明显增加.免疫组织化学染色结果显示,AngⅡ组CD3+T淋巴细胞浸润数为107.9±15.9,明显高于Sham组的0(P=0.000)和AngⅡ+ BTZ组的0.8±0.5 (P=0.000).流式细胞检测结果显示,造模1周后,AngⅡ组组织中CD3+T淋巴细胞比例为(13.50±0.69)％,明显高于AngⅡ+BTZ组的(10.40±0.78)％(=3.009,P=0.040);造模4周后,AngⅡ组的CD3+T淋巴细胞比例为(22.70 ±0.93)％,明显高于AngⅡ+BTZ组的(15.10±0.97)％ (t=5.654,P=0.005).qPCR检测结果显示,Sham组、BTZ组、AngⅡ组和AngⅡ+BTZ组ICAM-l的mRNA表达水平相比于Sham组升高比例分别为1.00±0.15、0.34±0.03、1.93±0.54和0.83±0.08 (F =6.797,P=0.001),其中,AngⅡ组明显高于Sham组(P =0.011)和AngⅡ+BTZ组(P =0.009).Western blot检测结果显示,AngⅡ组NF-κB核转录抑制因子磷酸化水平较Sham组和AngⅡ+BTZ组明显减少,并伴随p65磷酸化水平增加.结论 BTZ可能是通过抑制组织中NF-κB信号通路激活,下调ICAM-1表达,并进一步抑制CD3+T淋巴细胞聚集,减轻组织炎症反应,从而抑制AAA发生发展.

关键词：腹主动脉瘤、蛋白酶体、硼替佐米、炎症、核转录活化因子信号通路

所属期刊栏目：39

分类号：R363.2+1(病理学)

资助基金：国家自然科学基金81270390、 81470586;国家重点基础研究发展计划973计划2012CB517802;长江学者计划 Supported by the National Natural Sciences Foundation of China81270390,81470586;the National Basic Research Program of China 973 Program2012CB517802;the Chang Jiang Scholar Program

在线出版日期：2017-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：120-127