10.3881/j.issn.1000-503X.2010.04.016
阻断转化生长因子-β信号通路对自然杀伤细胞体外抗肿瘤效应的影响
目的 将pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒转染原代NK细胞阻断其转化生长因子-β(TGF-β)信号,观察对人结肠癌细胞株HT-29的体外杀伤能力.方法 将HT-29细胞与TGF-β1共孵育,使其终浓度为10ng/ml,采用Amaxa Nucleofector技术分别将pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒和pIRES2-AcGFP空质粒转染原代NK细胞,活细胞计数试剂盒-8法检测二者对HT-29的体外杀伤活性.结果 pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒和绿色荧光蛋白空质粒的转染效率分别为18.85%和35.28%;Western blotting、RT-PCR证实DNTβRⅡ在NK细胞表达;与TGF-β1共孵育后,原代NK细胞的杀伤活性减弱(效靶比10∶ 1时 14.40%±2.00%比26.14%±2.50%,P<0.05;效靶比20∶ 1时19.18%±2.49% 比 40.81%±3.50%,P<0.05);pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒转染组NK细胞的杀伤活性高于绿色荧光蛋白对照质粒转染组(效靶比10∶ 1时21.17%±2.49% 比11.48%±1.11%,P<0.05;效靶比20∶ 1时35.30%±3.78% 比17.19%±2.29%,P<0.05).结论 pIRES2-AcGFP-DNTβRⅡ质粒转染原代NK细胞提高了NK细胞的体外抗肿瘤活性,为NK细胞过继性免疫治疗提供了新的方法.
转化生长因子、自然杀伤细胞、结直肠癌
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R73-36+2(肿瘤学)
军队十一五重点课题06G106
2010-11-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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