HZF1在大肠杆菌中的表达及多克隆抗体的制备

摘要：

目的 在大肠杆菌中表达HZF1融合蛋白,制备抗HZF1抗体.方法构建包含编码HZF1非锌指区DNA的重组表达质粒pET30a-HZF1,转化大肠杆菌并用异丙基-a-D-硫代半乳糖苷诱导表达相应的融合蛋白,采用镍柱纯化.以纯化蛋白作为免疫抗原,对新西兰大白兔实施多次免疫(间隔时间分别为3、2和2周).用ELISA和Western blot检测抗体效价和特异性.结果 获得兔抗HZF1抗体,经过ELISA检测,效价在1∶100 000以上.Western blot显示兔抗HZF1抗体能够特异性检测氯高铁血红素诱导的K562细胞中的HZF1蛋白.结论 得到高特异性的兔抗HZF1抗体,为HZF1的功能研究以及组织和细胞中HZF1的检测奠定了一定基础.

关键词：HZF1基因、原核表达、亲和纯化、抗体

所属期刊栏目：29

分类号：Q784(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2002AA223071;国家重点基础研究发展计划973计划2002CCA04300;国家自然科学基金30421003

在线出版日期：2008-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：772-776