重建端粒酶活性延长ptsA58H质粒转染的人胚肌腱细胞寿命
目的探讨以重建细胞端粒酶活性,达到延长经ptsA58H质粒转化的人胚肌腱细胞系(THETC)寿命的可行性.方法构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)cDNA的质粒pGRN145,体外转染THETC;通过形态学观察、平板克隆形成率检测、软琼脂培养、不同培养条件下细胞生长曲线的测定,免疫组化法染色分析胶原分泌类型,hTERT mRNA表达及端粒重复序列扩增-PCR法检测细胞端粒酶活性等,对转染前后的细胞生物学特性进行比较.结果经pGRN145质粒体外转染的THETC(telT)有端粒酶活性表达,并继续保持旺盛的增殖能力,寿命延长.telT保持原有的温度依赖性及血清营养依赖性生长的特点,并正常分泌I型胶原,无恶性转化趋向.结论重建端粒酶活性可以延长THETC寿命,为建立组织工程标准细胞系提供了新的实验手段.
组织工程、肌腱细胞、基因转染、端粒酶
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Q785(基因工程(遗传工程))
国家重点基础研究发展计划973计划G1999054308;国家高技术研究发展计划863计划2001AA216011;中华医学基金会基金98-682
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
276-280