携带人尿激酶原cDNA的重组腺病毒载体的构建及其在体内的表达

摘要：

目的构建表达人尿激酶原的重组腺病毒载体,为临床基因治疗提供实验依据.方法采用亚克隆获得的pCA14-pro-UK重组质粒与质粒pJM1 7共转染培养的293细胞,经同源重组,得到含有pro-UK cDNA的重组腺病毒.扩增纯化后,局部转染经球囊损伤后的兔股动脉.7 d后,分别收集转染的血管段和对照血管段,以Western印迹和免疫组化检测表达.结果(1)经PCR扩增及体外感染A549细胞结果表明,获得了具有生物活性的含人pro-UK cDNA的重组腺病毒;(2)重组腺病毒的滴度为1×109噬菌斑形成单位/ml(PFU/m1);(3)免疫组化及Western印迹分析显示:重组腺病毒能在损伤的兔股动脉内膜表达尿激酶原.结论构建得到的携带人尿激酶原cDNA的重组腺病毒能在损伤血管部位表达.

关键词：尿激酶原、腺病毒、基因转移

所属期刊栏目：21

分类号：R541.4;Q789(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：中国医学科学院科研项目

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：425-430