应用RACE技术获取小鼠乳腺癌转移相关基因 G15γ5′端未知序列(论著摘要)

摘要：

@@ G15γ5′是本组以往用mRNA差异显示法从γ干扰素预处理的小鼠腺癌细胞系MA891中分离出的cDNA片段,推测其代表的基因可能与肿瘤转移有关.为进一步研究其功能,采用cDNA未端快速扩增技术(RACE),以获取该片段5′端未知序列.用IFN-γ(200 U/ml)处理MA891细胞48 h,提取总RNA并用DNaseI纯化.根据G15γ5′端序列,设计合成3个基因特异性引物GSP1,GSP2和GSP3.以GSP1为引物合成cDNA第1链,用末端转移酶在cDNA第1链的3′端进行同聚物加尾,对加尾后的cDNA先后用GSP2和GSP3与锚定引物进行初级及巢式PCR扩增,最终得到一552 bp的扩增产物并将其克隆至pCRTM Ⅱ载体,经Northern印迹分析及序列分析证实,所得片段确实是G15γ5′的5′端延续.

机标关键词：应用、技术获取、小鼠乳腺癌、转移相关基因、特异性引物、扩增技术、末端转移酶、差异显示法、肿瘤转移、印迹分析、序列分析、细胞系、设计合成、扩增产物、预处理、γ干扰素、载体、推测、提取、克隆

所属期刊栏目：20

分类号：F27;F12

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共1页

页码：190