吗啡对体外培养正常女性成骨细胞的增殖及BGP mRNA表达的影响
目的:观察阿片类药物是否对体外培养正常女性成骨细胞增殖有影响.方法:用胰酶-胶原酶消化法从正常女性松质骨中分离培养成骨细胞,用茜素红染色法、改良Gomonri钙钴法鉴定成骨细胞;制备不同浓度的吗啡及其拮抗剂纳洛酮,作用于体外培养的成人正常成骨细胞上,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测吗啡对其的影响;通过RT-PCR法半定量分析不同浓度的吗啡及其拮抗剂纳洛酮对成骨细胞骨钙素(BGP mRNA)表达的影响.结果:用酶消化法分离的人成骨细胞,在体外培养时可合成碱性磷酸酶(ALP)、形成钙化结节.不同浓度的吗啡组与对照组OD490(optical density,OD)值相比差异有显著性(P<0.001);1×10-7 molL-1、1×10-6 molL-1、1×10-5 molL-1和1×10-4 molL-1吗啡组的细胞增殖速度依次降低(P<0.001);而吗啡(10-5 molL-1)+纳洛酮(10-5 molL-1)组与对照组OD490值相比差异不明显(P>0.05).吗啡作用24 h呈剂量依赖性抑制BGP mRNA的表达.结论:用酶消化法进行人成骨细胞培养,简捷易行,可培养大量高纯度人成骨细胞供研究使用;外源性阿片类药物吗啡可直接抑制人成骨细胞的增殖.阿片类物质可以抑制成骨细胞内BGP mRNA的表达.
吗啡、人成骨细胞、酶消化法、MTT法、增殖、骨钙素
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R78;R73
2009-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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