诱导多能干细胞培养中饲养层制备的条件优化

摘要：

目的 建立分离培养小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryonic fibroblast MEF)的体系,探讨诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)培养所需饲养层的最佳制备方法,制备高质量的IPSC饲养层细胞.方法 采用胰蛋白酶消化法,将昆明小鼠胚胎制成细胞悬液接种培养.用不同浓度的丝裂霉素C处理MEF细胞制备饲养层,观察处理后的细胞活力及有无再增殖现象,在制备的饲养层细胞上接种IPS细胞,观察各组IPS细胞生长状态.结果 采用0.0625％胰蛋白酶消化孕12.5-14.5d雌鼠胚胎组织获得高活力的MEF细胞,用15μg/ml的丝裂霉素C处理后MEF细胞无明显增值,细胞活力在90％以上,其IPS细胞生长状况最好,效果最佳.结论 该方法可获得高活力的MEF细胞.15μg/ml的丝裂霉素C处理1.5h后的MEF细胞制成的饲养层最适于IPS细胞生长.

关键词：小鼠胚胎成纤维细胞、诱导多能干细胞、饲养层、丝裂霉素C

所属期刊栏目：25

分类号：R-33(医学研究方法)

在线出版日期：2017-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：69-70,90