单核细胞激活实验在疫苗类生物制品热原检测中的应用研究

摘要：

目的：研究人早幼粒白血病 HL-60单核细胞激活实验在疫苗类生物制品热原检测中的应用。方法：将 HL-60单核细胞分别与不同浓度热原（内毒素、酵母多糖和脂壁酸）标准品溶液、样品溶液进行孵育，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测孵育体系中 IL-6的含量。以热原标准品浓度为横坐标，IL-6量为纵坐标做标准曲线，将样品测得的 IL-6值代入该标准曲线，计算样品中热原的含量。选取处于标准曲线中间点的热原浓度，作为样品干扰试验中添加的热原浓度，参照《中国药典》细菌内毒素检查法中光度测定法中的干扰试验，用 HL-60/ IL-6单核细胞激活实验检测三种热原在流感疫苗、冻干甲型肝炎减毒活疫苗、冻干人用狂犬病疫苗、麻腮风联合减毒活疫苗、麻疹腮腺炎联合减毒活疫苗、双价肾综合征出血热灭活疫苗和 A 群 C 群脑膜炎球菌多糖疫苗7种疫苗中的回收率及其热原含量。结果：①不同浓度内毒素、酵母多糖和脂壁酸三种热原标准品刺激 HL-60细胞后，该细胞分泌 IL-6的量与热原浓度线性良好，R2分别为0．996，0．993，0．997。②该方法测定三种热原在以上7种疫苗中的回收率，回收率均在50％～200％之间。③以上方法测2个厂家10个批号 A 群 C 群脑膜炎疫苗中的内毒素含量，厂家 A 的6批样品内毒素平均值为134．73 EU·ml －1，厂家 B 的4批样品内毒素平均值为40．75 EU·ml－1。该方法检测其他6种疫苗中热原含量，结果均为阴性。结论：该方法适用于以上7种疫苗样品的热原检测。

关键词：热原检测、单核细胞、疫苗、生物制品、回收率

所属期刊栏目：19

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2016-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：870-872,873