环维黄杨星D调控Ca2+/CaMKⅡ信号改善醛固酮诱导心肌细胞损伤的实验研究

摘要：

目的 探讨环维黄杨星D(cyclovirobuxine D,CVB-D)对醛固酮(aldosterone,ALD)诱导原代大鼠心肌细胞(PNRC-Ms)损伤的保护作用及其机制.方法 通过胰酶消化法提取PNRCMs,以ALD(10μmol·L-1)制备PNRCMs损伤模型,给予不同剂量的CVB-D处理后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,Giemsa染色观察细胞形态变化,Flou-4AM荧光探针检测胞内Ca2+浓度,Western blot检测钙调蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ、p-CaMKⅡ)和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-9的表达水平.进一步采用钙离子螯合剂(BAPTA-AM),钙离子载体(A23187)及CaMKⅡ抑制剂(KN93)进行干预处理,分析Bcl-2,Bax,Cleaved caspase-9蛋白的表达变化.结果 与ALD组比较,CVB-D可显著恢复细胞活力,改善细胞的病理形态变化,上调Bcl-2/Bax的比值,下调Cleaved caspase-9和p-CaMKⅡ的表达并抑制胞内钙离子累积.进一步研究表明,BAPTA-AM和KN93能促进CVB-D上调Bcl-2/Bax的比值,下调Cleaved caspase-9的表达;而A23187可抑制CVB-D上调Bcl-2/Bax的比值,下调Cleaved caspase-9表达.结论 CVB-D可改善ALD诱导的原代心肌细胞损伤,其作用机制与Ca2+/CaMKⅡ信号通路相关.

关键词：环维黄杨星D、醛固酮、心肌细胞损伤、凋亡、钙离子、钙调蛋白激酶 Ⅱ

所属期刊栏目：37

分类号：R-332;R284.1;R285.5;R348.1;R345.57;R347.7;R541.61;R977.11;R977.3(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金资助项目;国家自然科学基金喀斯特中心项目;贵州省高层次创新型人才百层次人才;贵州省药学国际科技合作基地;贵阳市科技计划项目;贵州医科大学2018年度学术新苗培养及创新探索专项项目

在线出版日期：2021-04-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：564-570