基于cAMP/PKA通路研究当归芍药散提取液对阿霉素诱导IMCD3细胞损伤的保护作用

摘要：

目的 观察当归芍药散(Danggui-Shaoyao-San,DSS)提取液对阿霉素(adramycin,ADR)诱导损伤的内髓集合管(inner medullary collecting duct cell,IMCD3)细胞Na+,K+-ATP酶、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)、cAMP反应元件结合蛋白(CREB)及水通道蛋白-2(aquaporin 2,AQP2)的影响,从水液平衡的角度探讨其相关的保护机制.方法 以IMCD3细胞为研究对象,MTT法观察不同浓度ADR对IM-CD3细胞增殖的影响;将细胞分为正常组、模型组、DSS提取液低、中、高剂量组(0.8、1.6、3.2 g·L-1)、H-89抑制剂组;ELISA法检测细胞cAMP含量;试剂盒检测Na+,K+-ATP酶活性变化;Real-time PCR法检测PKA、CREB、水通道蛋白2(AQP2)mRNA表达;Western blot法检测Na+,K+-ATP酶、PKA、CREB、AQP2蛋白表达.结果 ADR对IMCD3细胞的损伤最适浓度为1×10-8 mol·L-1;不同浓度的DSS提取液均可有效抑制ADR诱导IMCD3细胞损伤,提高Na+,K+-ATP酶活性及细胞上清cAMP含量(P＜0.05),DSS(1.6、3.2g·L-1)可上调PKA、CREB、AQP2mRNA及蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).结论 DSS提取液对ADR诱导IMCD3细胞损伤模型具有一定的保护作用,与提高Na+,K+-ATP酶活性、激活cAMP-PKA-CREB通路有关.

关键词：当归芍药散提取液、Na+、K+-ATP酶、环磷酸腺苷、蛋白激酶A、水通道蛋白2、IMCD3细胞

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分类号：R289.5;R329.24;R341;R342.4;R345.57;R692;R979.14(中药学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81573720

在线出版日期：2019-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1765-1770