10.3969/j.issn.1001-1978.2017.10.011
异槲皮苷对HepG2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用
目的 研究异槲皮苷对HepG2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用.方法 采用异槲皮苷(0、40、80、160、320 μmol·L-1)作用于HepG2细胞,MTT法检测异槲皮苷对HepG2细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察24、48 h后,细胞形态及生长情况;流式细胞术检测异槲皮苷(0、40、80、160 μmol·L-1)作用HepG2细胞48 h后细胞周期情况;荧光定量PCR及Western blot检测异槲皮苷作用HepG2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及相关蛋白的表达.结果 MTT检测发现异槲皮苷对HepG2细胞生长有明显抑制作用,且与异槲皮苷的浓度及作用时间呈正相关;不同浓度的异槲皮苷作用HepG2细胞24、48 h后,倒置显微镜下观察发现随着浓度的增高及作用时间的延长,细胞生存数量逐渐减少,且细胞形态发生明显变化;流式细胞术检测发现随着异槲皮苷浓度的增高,细胞被阻滞在G1期的数量逐渐增加;荧光定量PCR及Western blot结果均表明,与空白组相比,异槲皮苷(80 μmol·L-1)作用HepG2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及其相关蛋白的表达均明显降低(P<0.05),差异有统计学意义.结论 异槲皮苷有诱导HepG2细胞凋亡的作用,其作用机制可能与对Raf/MEK/ERK信号通路中相关因子的干预有关.
异槲皮苷、诱导、HepG2细胞、Raf/MEK/ERK、信号通路、凋亡
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R284.1;R329.24;R329.25;R735.702.2(中药学)
国家自然科学基金资助项目81260661;广西自然科学基金资助项目2012GXNSFAA053079;桂林市科学研究与技术开发计划项目面上项目20140120-1-9,20170109-47;广西肝损伤与修复分子医学重点实验室子课题资助项目15-140-46-14
2017-09-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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