吗啡预处理对H9 c2心肌细胞缺氧/复氧时microRNA表达的影响

摘要：

目的：探讨吗啡预处理( morphine preconditioning, MPC)对 H9c2心肌细胞缺氧/复氧( hypoxia reoxygenation, H/R)时microRNA( miRNA)表达的影响,为明确其机制提供参考。方法培养H9 c2心肌细胞,随机分为3组( n=4)：①正常对照组(CON)：H9c2心肌细胞置于DMEM/F12细胞培养液常规培养；②缺氧/复氧组( H/R)：对心肌细胞行缺氧5 h/复氧1 h处理；③吗啡预处理组( MPC+H/R)：在H/R前,应用1μmol·L-1吗啡预处理10 min。处理结束后,采用CCK-8法检测细胞增殖、化学比色法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶( LDH)活性、Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡、Western blot法检测细胞内Fas蛋白表达、荧光定量RT-PCR法检测细胞 miRNA 表达水平。结果与 CON 组比,H/R组细胞活力降低,LDH活性升高,细胞凋亡率增加, Fas蛋白水平升高(P<0．01)；MPC可明显提高细胞活力,降低LDH活性,抑制细胞凋亡,降低Fas蛋白水平( P<0．01)。qRT-PCR结果显示,与 CON 组相比,H/R 组 miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216和 let-7e-5p表达明显下调,而MPC能明显地抑制H/R对这些miRNA表达的下调作用(P<0．01)。结论吗啡预处理减轻H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤可能与调控 miR-133a-5p、miR-133b-5p、miR-664-1-5p、miR-6216和let7e-5p等miRNA表达有关。

关键词：吗啡预处理、H9c2心肌细胞、缺氧/复氧、凋亡、Fas、微小RNA

分类号：R-332;R322.11;R329.25;R342.2;R542.2;R845.22;R971.2(医学研究方法)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81200171;安徽省科技厅年度重点项目1301043030;安徽省高校省级自然科学研究重大项目KJ2014ZD16

在线出版日期：2015-12-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1552-1557