雷酚萜甲醚抑制人胃癌细胞AGS增殖及诱导凋亡作用研究

摘要：

目的：研究雷酚萜甲醚( TME )在体外对人胃癌AGS细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法采用 MTT法观察TME对人胃癌AGS细胞、正常人胃黏膜上皮细胞GES-1的增殖抑制作用；克隆形成实验观察细胞克隆的形成；光镜下及AO / EB染色观察细胞形态；流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期；JC-1染色和DCFH-DA荧光探针分别检测TME对AGS细胞线粒体膜电位的改变和活性氧产生的影响；West-ern blot检测凋亡蛋白caspase-3、caspase-8和Bcl-2、Bax表达情况,以及 caspase 广谱抑制剂 z-VAD-fmk 对 caspase-3、caspase-8蛋白表达的影响。结果 TME可明显抑制人胃癌AGS细胞的增殖,并诱导其凋亡,作用48 h时IC50为23.85μmol·L-1,而对正常人胃黏膜上皮细胞GES-1的抑制作用明显低于AGS。 TME能够抑制AGS细胞克隆形成,并使细胞出现明显的凋亡形态改变。 Annexin V-FITC / PI双染实验表明,随TME剂量的增加,细胞凋亡百分数也增加。 JC-1和DCFH-DA结果显示, TME使细胞内线粒体膜电位降低、细胞内活性氧水平增加。 Western blot结果显示, TME增加了Bax / Bcl-2的比例,激活caspase-8和caspase-3,并且加入z-VAD-fmk后, caspase-3、caspase-8蛋白的表达降低。 TME可使AGS细胞周期阻滞于G0/G1期。结论 TME能抑制人胃癌AGS细胞增殖和诱导凋亡,抗肿瘤作用机制与激活凋亡通路、影响细胞周期及Bcl-2蛋白家族相关。

关键词：胃癌、细胞凋亡、雷酚萜甲醚、AGS细胞、caspase激活、Bcl-2家族蛋白、细胞周期

分类号：R284.1;R329.24;R329.25;R735.202.2;R979.1(中药学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划资助项目2009CB522806;国家科技部“重大新药创制”科技重大专项资助项目2012ZX09501001-004

在线出版日期：2014-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1066-1072