10.3969/j.issn.1001-1978.2013.06.030
一种新型大鼠结肠纵行肌细胞分离培养方法的建立
目的 对大鼠结肠纵行肌细胞分离培养的方法进行改进,建立一种取材方便,纯度高的新型大鼠结肠纵行肌细胞的原代分离培养方法,并观察乙酰胆碱和去甲肾上腺素对结肠纵行肌细胞的作用,为结肠纵行肌生理、病理的研究提供细胞模型.方法 取Wistar大鼠结肠,从外侧刮去外膜层,剥离外膜下结肠纵行肌,消化后过滤所剩组织进行贴块培养.观察乙酰胆碱和去甲肾上腺素对纵行肌细胞的作用,用NTS-Elements BR3.60分析软件进行分析.结果 经α-SM-actin免疫组织化学染色确定培养的细胞为平滑肌细胞,且纯度高;乙酰胆碱对大鼠结肠纵行肌细胞具有收缩作用,当浓度为5.5×10-1 μmol·L-1时,收缩作用最强.去甲肾上腺素对纵行肌细胞具有舒张作用,当浓度为4.86×10-2 mmol·L-1时,舒张作用最强.结论 从结肠外膜分离肠纵行肌层,消化后过滤,所剩组织进行贴块培养,此方法简便易行、纯度高,且对乙酰胆碱和去甲肾上腺素反应良好.
结肠纵行肌细胞、乙酰胆碱、去甲肾上腺素、大鼠、方法、细胞模型、细胞长度变化百分数
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R-332;R322.45;R322.74;R329.24(医学研究方法)
国家自然科学基金资助项目81073132;校级自主课题2011YJB22X5029
2013-07-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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