土槿皮乙酸诱导人胃癌SGC7901细胞凋亡及机制

摘要：

目的 研究土槿皮乙酸(pseudolaric acid B,PAB)诱导人胃癌SGC7901细胞株凋亡及其分子机制.方法 MTT法检测细胞增殖的抑制作用,电镜观察细胞的形态学变化,AnnexinV/PI双染法检测细胞早期凋亡率,罗丹明染色流式细胞仪检测线粒体膜电位,Western blot检测PAB对caspase-3、caspase-9剪切片断,bcl-2、bax蛋白表达,及对MAPKs通路相关蛋白,包括p-ERK、ERK、p-JNK、JNK、p-p38、p38表达的影响.结果 PAB对人胃癌SGC7901细胞株生长具有明显的抑制作用,并呈时间和浓度依赖性.电镜结果 显示0.5 μmol·L-1 PAB作用24 h后,核染色体聚集、边集,72 h凋亡小体形成.用0.5 μmol·L-1 PAB处理SGC7901细胞12、24、48、72 h,AnnexinV/PI双染检测细胞的早期凋亡,其早期凋亡率分别为10.06%、15.98%,23.12%,29.06% ,而对照组的早期凋亡率仅为0.9%(P<0.05) .罗丹明染色检测线粒体膜电位,0.5 μmol·L-1浓度的PAB作用于SGC7901细胞12 h后,线粒体膜电位开始下降并随时间延长而逐渐增加,12、24、48、72 h线粒体膜电位下降分别为26.36%、33.26%、41.28%、52.13%(P<0.05或0.01).0.5 μmol·L-1浓度的PAB作用于SGC7901细胞24 h后,Western blot法检测发现caspase-3、 caspase-9 2种蛋白均出现断裂片断,并随着时间的增加断裂更明显.进一步研究发现,PAB处理SGC7901细胞后,bax蛋白表达升高,bcl-2蛋白表达下降,同时JNK、p38的磷酸化水平明显升高,ERK表达水平下降.结论 PAB具有明显的细胞毒作用,能诱导SGC7901细胞凋亡,JNK和p38途径激活后通过对bax 和bcl-2表达的调控,导致线粒体膜电位的下降,进而激活caspase最终导致细胞死亡,可能是其诱导胃癌细胞凋亡的分子机制之一.

关键词：土槿皮乙酸、SGC7901细胞、细胞凋亡、信号转导

所属期刊栏目：24

分类号：R284.1;R329.24;R329.25;R73-351;R735.202.2(中药学)

在线出版日期：2008-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：601-606