阿尔采末病淀粉样前体蛋白(APP)和早老素-1(PS-1)双重基因稳定转染细胞系的建立

摘要：

目的构建APP751和PS-1(M146L)双重基因稳定转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系,以用于β-分泌酶或γ-分泌酶抑制剂的研究和相关药物的筛选.方法从人胎盘基因文库中用多聚酶链反应(PCR)方法扩增野生型和突变型PS-1(M146L)基因,并重组克隆到PCI-neo质粒,用脂质体(LipofectAmine)法将野生型和突变型(M146L)PS-1转染至含APP751表达基因的CHO细胞,选择培养液筛选能稳定表达目的基因的CHO细胞株.用免疫沉淀和ELISA测定分析细胞表达产物.结果建立了数株能表达Aβ和PS-1的CHO细胞.在转染细胞株中高表达的SP-1为全长45 kd的PS-1蛋白;野生型PS-1和突变型PS-1(M146L)以及单纯APP751转染的CHO细胞株均可分泌Aβ多肽,且突变型PS-1(M146L)转染的细胞株分泌到条件培养液中的Aβ1-42比其它细胞株增加了近两倍.结论突变型PS-1(M 146L)的高表达可促使Aβ1～42的分泌增加.我们建立的PS-1和APP双重基因稳定转染的CHO细胞株模型,可用于β-分泌酶或γ-分泌酶抑制剂的研究和相关药物的筛选.

关键词：β-淀粉样变多肽、早老素-1、β-或γ-分泌酶、基因转染

所属期刊栏目：20

分类号：R745.7;R394;R341(神经病学与精神病学)

在线出版日期：2004-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：508-511