lncRNA H19靶向miR-194对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制

摘要：

目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA) H19靶向微RNA 194 (miR-194) 对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制.方法 收集2018年1月至2019年6月大连医科大学附属大连市第五人民医院骨外二科行骨肉瘤切除术患者的骨肉瘤组织及对应癌旁组织标本各30例.采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR) 检测30例骨肉瘤组织、对应的癌旁组织以及人正常成骨细胞hFOB1.19和骨肉瘤细胞SAOS-2、U2OS中lncRNA H19和miR-194的表达水平.利用脂质体转染法将lncRNA H19小干扰RNA (si-H19组)、RNA干扰无意义序列 (si-NC组)、miR-194模拟物 (miR-194 mimics组)、miRNA阴性对照 (miR-NC组) 分别转染SAOS-2细胞,MTT法检测各组细胞活力,细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力,Western blotting检测细胞N-钙黏蛋白 (CDH2) 和1型胰岛素样生长因子受体 (IGF1R) 蛋白的表达.生物信息学分析、双荧光素酶报告基因实验和qRT-PCR验证lncRNA H19和miR-194的靶向调控关系.结果 与癌旁组织比较,骨肉瘤组织中lncRNA H19的表达水平升高,miR-194的表达水平降低 (均P < 0.05);与人正常成骨细胞hFOB1.19比较,骨肉瘤细胞SAOS-2、U2OS中lncRNA H19表达水平升高 (P < 0.05),miR-194表达水平下降 (P < 0.05).与si-NC组比较,si-H19组SAOS-2细胞活力降低,侵袭能力降低,CDH2和IGF1R蛋白表达水平降低 (均P < 0.05);与miR-NC组比较,miR-194 mimics组SAOS-2细胞的活力降低,侵袭能力降低,CDH2和IGF1R蛋白表达水平降低 (P < 0.05).生物信息学分析及双荧光素酶报告基因实验结果显示,lncRNA H19可以靶向调控miR-194.干扰miR-194的表达逆转了抑制lncRNA H19的表达对骨肉瘤SAOS-2细胞增殖和侵袭的影响.结论 lncRNA H19在骨肉瘤组织和细胞系中的表达升高,miR-194在骨肉瘤组织和细胞系中的表达下降,沉默骨肉瘤细胞SAOS-2中lncRNA H19的表达,能够抑制骨肉瘤细胞的增殖和侵袭,其机制可能与上调SAOS-2细胞中miR-194表达,进一步下调CDH2和IGF1R的表达有关.

关键词：长链非编码RNA、H19、微RNA 194、骨肉瘤细胞、增殖、侵袭

所属期刊栏目：52

分类号：R738.1(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金81972522

在线出版日期：2023-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：212-218