NaV1.5钠通道C末端IQ基序的重组质粒构建及蛋白制备

摘要：

目的 构建NaV1.5钠通道C末端IQ基序原核表达载体并进行蛋白表达、纯化和生物学鉴定.方法 将IQ基序的cDNA片段插入pGEX-6P-3质粒载体后转化大肠杆菌BL21感受态细胞,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,Glutathione-Se-pharos 4B分离纯化后采用SDS-PAGE检测目的蛋白纯度和相对分子质量,pull-down方法检测GST-IQ融合蛋白的生物学活性.结果 构建的IQ重组质粒经限制性内切酶和基因测序双重鉴定显示质粒构建成功,融合蛋白经纯化后其浓度和纯度均较高,并具有能够与CSL蛋白浓度依赖性结合的生物学活性.结论 本研究成功构建了可以表达生物活性蛋白的NaV1.5钠通道IQ基序原核表达载体,为深入探讨NaV1.5钠通道的生物学功能奠定了重要的物质基础.

关键词：NaV1.5钠通道;IQ基序;重组质粒;pull down实验

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分类号：R966(药理学)

资助基金：国家自然科学基金青年基金;辽宁省教育厅科学研究项目-基础研究项目;辽宁省中央引领地方科研发展专项;中国医科大学新冠肺炎疫情防控相关科研攻关项目

在线出版日期：2021-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：694-698