转录因子RUNX2对IPO8基因启动子的调节作用

摘要：

目的 研究转录因子RUNX2对IPO8基因启动子的调控作用.方法 基于PCR技术,分别突变和剔除IPO8基因启动子片段P-732/+ 134上RUNX2结合位点(-497～-502 bp),改造后的启动子片段定向插入荧光素酶表达载体PGL-3 Basic.重组质粒分别转染Saos-2与HeLa细胞,检测报告基因荧光素酶活性.应用染色质免疫共沉淀(ChIP)证实RUNX2与IPO8启动子在Saos-2细胞内结合.慢病毒介导RUNX2在Saos-2细胞的靶向沉默,定量PCR检测相应组别中IPO8 mRNA的表达.结果 成功突变和剔除IPO8启动子上RUNX2结合位点,破坏RUNX2结合位点导致IPO8启动子活性在Saos-2细胞中显著下降(P＜0.05) 转录因子RUNX2在Saos-2细胞与IPO8启动子有效结合,下调RUNX2的表达导致IPO8转录水平下降(P＜0.05).结论 转录因子RUNX2正性调控IPO8基因的转录.

关键词：IPO8、RUNX2、启动子、荧光素酶

所属期刊栏目：43

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金81060075,81260140;江西省教育厅科学研究项目GJJ12683

在线出版日期：2014-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：585-588