TAT-Apoptin融合蛋白分泌表达载体的构建及其活性检测

摘要：

目的 构建具有自主跨膜能力的Apoptin融合蛋白表达载体,使其分泌表达,避开包涵体复性,简化制备工艺.方法 人工合成反式激活蛋白(TAT)序列,与Apoptin序列融合,连接到pET22b+载体上,构建原核分泌表达载体pET22b+-TAT-Apoptin,IPTG诱导目的蛋白分泌表达到大肠杆菌周质空间,提取蛋白行SDS-PAGE分析,MTT法检测分泌表达的融合蛋白对胃癌823细胞的抑制作用.结果 重组TAT-Apoptin蛋白可分泌至大肠杆菌周质空间中,以可溶状态存在,对胃癌823细胞的最大抑制率为83.95％.结论 成功构建重组TAT-Apoptin蛋白表达载体,分泌表达的可溶性融合蛋白具有生物活性.

关键词：反式激活蛋白、凋亡素、分泌表达、凋亡

所属期刊栏目：42

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：辽宁省教育厅高校科研计划2009A310;辽宁省科学技术计划项目2010225036;沈阳市科技计划项目2009-15

在线出版日期：2013-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：45-48