外源性骨形态发生蛋白7联合血管内皮生长因子诱导大鼠脂肪干细胞向成骨细胞分化的实验研究
探讨脂肪干细胞经低浓度骨形态发生蛋白7( BMP-7)及血管内皮生长因子(VEGF)短期诱导后骨细胞方向的分化情况.方法 无菌切取成年Wistar大鼠腹股沟处脂肪,Ⅰ型胶原酶消化法体外分离培养脂肪干细胞,分为4组:各组均加入含10%FBS的DMEM培养基,0.1 μmol/L地塞米松,50 μmol/L维生素C,10 mmol/L β-甘油磷酸钠,100 U/mL青霉素,100 U/mL链霉素;在此基础上,第1组加BMP-7和VEGF(各5 ng/mL);第2组加BMP-7( 10 ng/mL);第3组加VEGF( 10 ng/mL);另设第4组(空白组),加高糖DMEM.每3d更换培养基.至1,5,7,10,14 d观察细胞生长及转化情况,通过免疫组化、ALP染色、茜素红钙结节染色及MTT等检测不同组别诱导的成骨细胞.结果 细胞计数、MTT、ALP活性检测及免疫组化灰度值检测证实4组诱导液诱导脂肪干细胞向成骨细胞分化的能力:BMP-7+VEGF组>BMP-7组>VEGF组>空白组.结论 与单独使用BMP-7、VEGF或基础培养基相比,BMP-7联合VEGF有加快脂肪干细胞向成骨细胞分化的能力.
脂肪干细胞、骨形态发生蛋白7、血管内皮生长因子、成骨细胞
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Q813.1(生物工程学(生物技术))
2013-02-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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