细粒棘球蚴重组St-Eg.ferritin疫苗构建与免疫性分析

摘要：

目的 探讨以减毒沙门菌为载体,构建表达细粒棘球蚴Eg.ferriti蛋白口服活载体疫苗的可行性.方法 从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA,通过RT-PCR扩增细粒棘球蚴Eg.ferritin基因,然后将Eg.ferritin基因插入到pYA3341表达载体中,构建重组质粒pYA3341-Eg.ferritin,将重组质粒依次电转入减毒鼠伤寒沙门菌X3770和X4550,获得重组菌株St-Eg.ferritin,对重组菌的稳定性、安全性以及免疫原性进行评价.结果 经酶切鉴定成功构建了重组质粒pYA3341-Eg.ferritin,Western blot结果证实Eg.ferritin蛋白在重组菌中获得了表达;重组菌株在体外至少传代10次而保证重组质粒不丢失;小鼠免疫试验证实,重组菌安全无毒性;重组菌口服免疫小鼠可检测到Eg.ferritin特异性IgG抗体.结论 本试验成功构建了能稳定表达细粒棘球蚴Eg.ferritin蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门菌活载体疫苗株,并显示了良好的免疫原性和安全性,为包虫病新型口服基因工程活载体疫苗的研制奠定基础.

关键词：细粒棘球蚴、Eg.ferritin、减毒鼠伤寒沙门菌、免疫原性

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分类号：R383.3(医学寄生虫学)

资助基金：宁夏自然科学基金NZ12199;宁夏卫生厅项目2013125;宁夏医科大学校级面上项目XM2012032

在线出版日期：2014-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：495-498