小肠结肠炎耶尔森菌环介导管温扩增技术检测方法的建立

摘要：

目的 将一种新颖的核酸扩增技术--环介导等温扩增技术(LAMP)应用于小肠结肠炎耶尔森菌的快速检测.方法 针对小肠结肠炎耶尔森氏菌毒素基因yruI/yruR设计5条特异性引物,进行LAMP扩增,对扩增反应进行优化.并考核方法的敏感性和特异性.结果 最佳反应时间为60 min,反应温度为60℃.对8种相关肠道细菌进行LAMP扩增,仅小肠结肠炎耶尔森菌得到阳性扩增结果,证明引物具有很高的特异性.小肠结肠炎耶尔森菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别约为74 fg和43 cfu/ml.对模拟食品样品进行直接检测,检测限为76 cfu/g.结论 本方法检测小肠结肠炎耶尔森菌特异性强、灵敏度高,并且操作简便、检测成本低,1.5 h即可完成,有望发展成为快速检测小肠结肠炎耶尔森菌的有效手段.

关键词：小肠结肠炎耶尔森菌、环介导等温扩增技术(LAMP)、检测方法

所属期刊栏目：11

分类号：R115(卫生基础科学)

在线出版日期：2010-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：92-96